上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

货号：UPLC-MS-4409	规格：100T/48S	微量法
货号：UPLC-MS-4408	规格：50T/24S	可见分光光度法

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂二：临用前将试剂二 B、试剂二 C 倒入试剂二 A，充分溶解待用；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；

2. 试剂三：临用前加入 6 mL 双蒸水，充分溶解待用；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；

3. 试剂四：临用前加入 15 mL 双蒸水，溶解后 4℃保存一周；

4. 试剂五：临用前加入 15 mL 双蒸水，溶解后 4℃保存一周；

5. 标准品：10 μmol/mL 标准磷贮备液；

6. 提取液的配制：按提取液一：提取液二=990：10（V：V）的比例配制，根据样本量现配现用，禁止将提取液二一次性全部加入提取液一混匀分装待用；

7. 工作液（定磷剂）的配制：按 H₂O：试剂四：试剂五：试剂六=2:1:1:1 的比例配制，配好的工作液应为浅黄色；若变色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，工作液应现配现用；

注意：配试剂*好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。

产品说明：

乙酰辅酶A羧化酶（Acetyl-CoA carboxylase，ACC）在生物体内催化乙酰辅酶A羧化生成丙二酰辅酶A，是脂肪酸和许多次生代谢产物合成的关键酶。ACC的活性在一定程度上决定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低。

ACC能够催化乙酰辅酶A、NaHCO₃和ATP生成丙二酰辅酶A、ADP和无机磷，钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质，通过钼酸铵定磷法测定无机磷的增加量来测定ACC活性。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、天平、低温离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、漩涡震荡仪、水浴锅、蒸馏水、冰盒、EP管。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参文献）

1、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液） 进行冰浴匀浆，然后，8000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。

2、细菌或细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 8000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。

3、血清（浆）：直接测定。

二、测定步骤

1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至660nm，蒸馏水调零。

2、 临用前将试剂一、试剂二、试剂三在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）预热10min。

3、 将10μmol/mL标准液用蒸馏水稀释为1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078μmol/mL的标准溶液备用。

4、 操作表：(在1.5mL离心管中依次加入下列试剂)

 三、ACC 活性计算

                    1. 标准曲线的绘制：